Диагностика in vitro

Содержание

Мир научных исследований задает себе вопросы перед лицом неизвестного, которое нас окружает, и пытается найти ответы путем экспериментов.. В частности, при изменении биологических наук (будь то биохимия, биология, ветеринария, биомедицина …) он пытается решать вопросы, связанные с живыми существами.

Например, насколько эффективно вещество для лечения определенного заболевания? Какова соответствующая доза, чтобы оно оказывало терапевтический эффект, а также не создавало побочных реакций? Как работают раковые клетки? тело и генерировать метастазы? Все эти вопросы — лишь малая часть по сравнению с количеством неизвестных, которые ученые задавали на протяжении всей истории.

Клинико-лабораторные испытания МИ для диагностики in vitro

Для проведения клинических испытаний МИ для диагностики in vitro, в виду особенностей их госрегистрации МИ, получать разрешение для проведения клинических испытаний от РЗН не нужно.

Клинические испытания МИ для диагностики in vitro проводятся в лабораторных условиях с применением образцов биоматериала пациентов, взятых в ходе лечебно-диагностического процесса, и потому называются клинико-лабораторными испытаниями. Их цель проверить функциональные свойства и (или) эффективность медизделия при использовании по назначению, предусмотренному документацией производителя. Если испытания осуществляются в целях диагностики новых или редко встречающихся природно-очаговых инфекционных заболеваний, их тест-штаммы могут быть взяты из государственных, национальных, исследовательских и иных коллекций патогенных микроорганизмов.

Документы, необходимые для клинико-лабораторных испытаний, в целом не отличаются от общего перечня документов, требующихся для клинических испытаний остальных медизделий. Это заявление о проведении испытаний, образцы медиделия с принадлежностями, акт оценки результатов техиспытаний, эксплуатационная документация. При наличии можно представить также документы (материалы), содержащие анализ данных применения медицинского изделия in vitro и (или) результаты испытания в целях утверждения типа средств измерений (в отношении медицинских изделий для диагностики in vitro, относящихся к средствам измерений в сфере государственного регулирования обеспечения единства измерений). При рассмотрении представленной документации согласовывается программа и продолжительность клинико-лабораторных испытаний.

В рамках клинико-лабораторных испытаний осуществляются:

• анализ представленной документации;
• составление программы испытаний;
• проведение клинико-лабораторных испытаний образцов (образца) МИ для диагностики in vitro вместе с принадлежностями (оборудование, наборы реагентов, калибраторы, реактивы, тест-системы, контрольные материалы и калибраторы, питательные среды), необходимыми для применения по назначению;
• оценка и анализ полученных данных и их соответствие заявленным характеристикам;
• доработка эксплуатационной документации производителя по результатам испытаний (при необходимости);
• оформление и выдача (вручение или направление заказным почтовым отправлением с уведомлением о вручении) заявителю акта оценки результатов клинико-лабораторных испытаний. Форма акта представлена в Приложении № 5 к Приказу Минздрава России от 09.01.2014 № 2н.

Результаты клинико-лабораторных испытаний считаются отрицательными в 2 случаях:

• испытуемое медизделие не соответствует предназначенному производителем применению и предлагаемым им методам использования;
• установлены факты и обстоятельства, создающие условия неэффективности и (или) прямой или косвенной угрозы жизни и здоровью медицинских работников при применении и эксплуатации МИ.

Во всех остальных случаях результаты клинико-лабораторных испытаний считаются положительными и подтверждают соответствие испытанного МИ требованиям безопасности и эффективности.

Гипофункция и гиперфункция эстрогенов

Содержание гормонов никогда не бывает постоянным. С возрастом, а также по ходу менструального цикла у женщин концентрация гормонов меняется.

Гипофункция (пониженная выработка) эстрогенов бывает врожденной и приобретенной. Она может приводить к таким тяжелым последствиям, как преждевременное истощение яичников или ранний остеопороз. При гипофункции эстрогенов могут возникать маточные кровотечения или же, напротив, аменорея — отсутствие менструаций, бесплодие. В более зрелом возрасте гипофункция может вызывать симптомы менопаузы — приливы (ощущение жара), ночную потливость, бессонницу.

Гиперфункция (избыток) эстрогенов может стать причиной раннего полового созревания или гинекомастии (доброкачественного увеличения грудной железы у мужчин).

§ 48. Основные правила записи латинской

Латинская часть рецепта начинается с обязательного условного сокращения Rp. (Recipe) — возьми — формы повелительного наклонения глагола recipere — взять, брать. После Rp. следует перечисление названий лекарственных веществ и их доз. При этом необходимо руководствоваться нижеследующими правилами.

1. Название каждого лекарственного вещества пишут с новой строки и с заглавной буквы. С заглавной буквы в середине строки пишут названия лекарственных растений, химических элементов и соединений, препаратов. Прилагательные, анионы солей и названия частей растений пишут в рецептах с маленькой буквы.

2. Название каждого лекарственного вещества пишут в родительном падеже, так как оно грамматически зависит от указания дозы (количества).

Грамматическая модель рецептурной фразы

Название лекарства в родительном падеже

3

В названиях лекарственных веществ определение всегда стоит после определяемого слова, при этом несогласованное определение предшествует согласованному; при двух согласованных определениях место каждого определяется значимостью слова, например:

Extractum Belladonnae fluidum — жидкий экстракт красавки.

Acidum hydrochloricum dilutum — разведенная хлористоводородная

4. Дозу лекарственного вещества указывают:

а) в граммах и его долях — арабскими цифрами десятичными дробями. 1 грамм — 1,0; 2 дециграмма — 0,2; 10 граммов — 10,0; 1 сантиграмм — 0,01; 1 миллиграмм — 0,001;

б) жидкости выписываются в миллилитрах (0,1 мл, 20 мл и т. д.) или в каплях. Капли в отличие от граммов обозначают римскими цифрами с написанием слова «капли» и винительном падеже: одну каплю — guttam I (Асc. sing.), десять капель — guttas X (Асc. plur.), например:

Recipe: Olei Eucalypti guttam I. — Возьми: эвкалиптового

Recipe: Olei Menthae guttas X. — Возьми: мятного масла

в) в единицах действия. У лекарственных веществ, дозируемых в биологических единицах действия (сокращенно ЕД), количество пишут арабскими цифрами в десятках, тысячах, миллионах, например:

Recipe: Tetracyclini hydrochloridi 100000 ED. — Возьми: тетрациклина гидрохлорида 100 000 ЕД;

г) если несколько веществ в рецепте выписывают в одинаковом количестве, то дозу указывают только один раз после последнего из перечисляемых веществ, а перед цифрами, обозначающими его количество, ставят наречие ana — поровну, по, например:

Amidopyrini ana 0,25

Амидопирина по 0,25.

5. В рецепте врач также указывает по латыни, какую лекарствен­ную форму надо придать лекарственным веществам (порошки, таб­летки, мази), каким операциям их подвергнуть, в каком количестве выдать и в какой упаковке.

Для лекарств, требующих определенной упаковки отпуска, в рецептах делают нужные указания:

Da in vitro nigro — отпусти в черной склянке,

Da in vitro flavo — отпусти в желтой склянке,

Da in charta paraffinata — отпусти в парафинированной бумаге,

Da in charta cerata — отпусти в вощеной бумаге,

Da in ampullis — отпусти в ампулах.

Латинская часть рецепта заканчивается условным сокращением S. (Signa) — обозначь (форма повелительного наклонения глагола signare — обозначать).

Дополнительные надписи на рецептах.

1. Cito! (быстро, срочно!) — врач указывает в верхней части рецептурного бланка в случае необходимости экстренного приготовле­ния лекарства (или Citissime! — очень срочно! Statim! — немедленно!).

2. Если на обратной стороне рецептурного бланка есть продолжение, то врач пишет внизу справа Verte! — переверни! (сокращен­но V.!).

3. Если выписанное количество лекарства необходимо повторить, то врач надписывает вверху рецептурного бланка Repete! — повтори! Repetatur! — повторить! Или Bis repetatur! — повторить дважды!

Источник

Преимущества использования In Vitro в научных исследованиях

1. Объективность результатов:

Использование метода In Vitro позволяет проводить исследования в контролируемых условиях вне живого организма. Это позволяет получить более точные и надежные результаты, поскольку исключены влияния факторов, присущих живым организмам, таких как обменные процессы, внутренние факторы и окружающая среда.

2. Экономия времени и ресурсов:

Использование In Vitro позволяет исследователям избежать длительного процесса отбора исследуемых объектов из живых организмов. Это существенно сокращает время, затрачиваемое на исследования, а также снижает необходимость в использовании большого количества животных и, как следствие, экономит ресурсы.

3. Этические преимущества:

Использование In Vitro позволяет проводить исследования без нанесения вреда или страдания животным или людям. Заменяя эксперименты на животных или клеточные культуры, исследователи могут избежать этических проблем, связанных с живыми организмами, и вместо этого использовать ткани, клетки или органы, полученные от доноров или искусственным путем.

4. Уменьшение рисков для исследователей:

Проведение научных исследований вне живых организмов несет меньше рисков для исследователей, так как исключаются возможные негативные воздействия, связанные с работой с живыми организмами. Кроме того, In Vitro методы позволяют исследователям проводить многочисленные эксперименты без необходимости постоянного восстановления живых организмов.

5. Расширение возможностей исследований:

Использование метода In Vitro позволяет проводить более сложные эксперименты и исследования, которые были бы невозможны или очень сложны при использовании живых организмов. Благодаря контролируемым условиям и возможности внесения изменений в эксперимент, исследователи имеют больше возможностей для изучения различных аспектов исследуемых объектов.

6. Безопасность:

Использование метода In Vitro позволяет проводить исследования в безопасных для исследователей условиях

Это особенно важно при изучении инфекционных болезней или токсических веществ, которые могут представлять опасность для человека или животных. Использование In Vitro методов позволяет провести тестирование на безопасность и эффективность, минимизируя риски для исследователей и окружающей среды

Вывод
Метод In Vitro является незаменимым инструментом в научных исследованиях. Он позволяет проводить исследования в контролируемых условиях, получать объективные результаты, экономить время и ресурсы, уменьшать этические проблемы, обеспечивать безопасность и расширять возможности исследований. Благодаря преимуществам In Vitro методов, ученые могут продвигаться вперед в своих открытиях и улучшении нашего понимания живых систем.

Окрашивание тканей индийскими чернилами

Другая функция, которую могут выполнять китайские чернила, — в лабораториях патологии. Это применяется к образцам ткани, удаленным хирургическим путем, чтобы отметить края резекции опухоли.

Маркированная ткань опрыскивается уксусной кислотой. Это действует как протрава и предотвращает отслоение чернил, когда ткань подвергается обычной обработке для подготовки биопсии.

Процедура заключается в купании ткани в спирте и ксилоле, а затем впитывании парафином. Эта маркировка направляет патолога при наблюдении за тканью, указывая, где находится край хирургической резекции или другой интересный объект..

Клинические испытания in vivo

В отличие от исследований in vitro, исследования in vivo необходимы, чтобы увидеть, как организм в целом будет реагировать на конкретное вещество.

В некоторых случаях исследования лекарственного средства in vitro будут многообещающими, но последующие исследования in vivo не могут показать какую-либо эффективность (или, с другой стороны, найти лекарство небезопасным) при использовании в рамках множества метаболических процессов, которые постоянно происходят. в организме.

Примером того, как необходимы исследования in vivo для оценки лекарств, является их абсорбция в организме. Может показаться, что новое лекарство действует в посуде, но не в организме человека. Возможно, лекарство не всасывается при прохождении через желудок и поэтому мало влияет на человека.

В других случаях (даже если лекарство вводится внутривенно) может случиться так, что лекарство расщепляется организмом в результате любого количества реакций, которые происходят постоянно, и, следовательно, лекарство не будет эффективным при непосредственном применении у людей.

Важно отметить, что зачастую исследования in vivo сначала проводятся на животных, не относящихся к человеку, таких как мыши2. Эти исследования позволяют исследователям увидеть, как лекарство действует среди других процессов в организме. У мышей и людей есть важные различия

Иногда лекарство, эффективное для мышей, не будет эффективным для человека (и наоборот) из-за внутренних различий между видами

У мышей и людей есть важные различия. Иногда лекарство, эффективное для мышей, не будет эффективным для человека (и наоборот) из-за внутренних различий между видами.

В теории информации[]

Негэнтропийный принцип информации Брюллиэна

Американский физик Леон Брюллиэн, исследуя взаимопревращение видов энергии, сократил термин «отрицательная энтропия» до «негэнтропия» и ввел этот термин в теорию информации (), сформулировав свой негэнтропийный принцип информации:

Дифференциальная негэнтропия

В теории информации и статистике, дифференциальная негэнтропия используется как мера отклонения от нормальности . Рассматривают сигнал с некоторым распределением. Сигнал называют гауссовским, если он имеет нормальное распределение. Дифференциальная негэнтропия сигнала всегда неотрицательна, инвариантна при любых линейных обратимых преобразованиях координат и исчезает, если и только если сигнал является гауссовским.

Дифференциальная негэнтропия определяется как

J(px)=S(ϕx)−S(px),{\displaystyle J (p_x) = S (\phi_x) — S (p_x),}

• где ϕx{\displaystyle \phi_x } имеет гауссовскую плотность с тем же самым средним и дисперсией как px{\displaystyle p_x},
• а S(px){\displaystyle S(p_x)} — дифференциальная энтропия:

S(px)=−∫px(u)log⁡px(u)du.{\displaystyle S (p_x) = — \int p_x (u) \log p_x (u) du.}

Дифференциальная негэнтропия используется в статистике и обработке сигналов, имеет отношение к сетевой энтропии, которая используется в независимом компонентном анализе . Интуитивно дифференциальная негэнтропия понимается как информация, которая может быть сохранена, если представить px{\displaystyle p_x} эффективным способом; а ϕx{\displaystyle \phi_x } — случайная величина (с гауссовским распределением) с тем же самым средним и дисперсией, которая нуждается в максимальной длине данных для представления самым эффективным способом. Поскольку px{\displaystyle p_x} менее случайна, то кое-что о ней известно заранее, она содержит меньше неизвестной информации и нуждается в меньшей длине данных для представления самым эффективным способом.

Эксперименты in vitro проводятся перед

В общем, чтобы попытаться решить научный вопрос, исследователи выдвигают гипотезу. Например, «мы считаем, что соединение из этого растения специально нацелено на опухолевые клетки и помогает уменьшить их популяцию». Эта гипотеза — это просто идея, которая может быть основана на предыдущих теоретических знаниях, традиционных медицинских практиках или просто на чистой интуиции.

Обычно исследователи устанавливают хронологию, то есть они сначала проводят эксперименты с персонажами in vitro, в чашках Петри, где учитываемые переменные значительно сокращены и контролируются. После этого они обычно переходят к экспериментам типа ex vivo или in vivo. Например, в связи с предыдущим определением, когда вы проверяете чисто молекулярные механизмы соединения, вы переходите к изучению его действия в клетках исследуемого животного (во многих случаях это обычно клетки мышей, крыс или людей) в более контролируемая среда, например, в чашке Петри (ex vivo).

Вы также можете пойти на эксперимент in vivo, где вы изучаете действие соединения на опухолевые клетки, а также учитываете другие факторы, которые могут определить конечный результат. Например, иногда мы можем найти соединения, которые являются суперэффективными, когда они находятся в прямом контакте с опухолевыми клетками, но если они вводятся в систему крови или перорально, существуют определенные барьеры, которые препятствуют транспортировке соединения к конечному пункту назначения, где в них обнаруживаются опухолевые клетки.

Кроме того, это соединение также может оказывать неблагоприятное воздействие на другие клетки организма

Вот почему изучение соединения в этих трех типах научных экспериментов важно, поскольку они могут предоставить разные данные., дополнительная и ценная информация для дизайна конечного продукта

Рекомендуем прочитать: «21 вид исследований (и их характеристики)»

Медицинские исследования in vitro

Медицинские исследования (например, изучение способности лекарства лечить рак) часто сначала проводят in vitro — либо в пробирке, либо в лабораторной посуде. Примером может служить выращивание раковых клеток в посуде вне тела для изучения их и возможных методов лечения.

Исследования обычно сначала проводятся in vitro по этическим соображениям. Исследования in vitro позволяют безопасно изучать вещество, не подвергая людей или животных возможным побочным эффектам или токсичности нового лекарства.

Исследователи узнают о препарате как можно больше, прежде чем подвергать людей потенциальному негативному воздействию. Если, например, химиотерапевтический препарат не действует на раковые клетки, выращенные в чашке, было бы неэтично заставлять людей использовать это лекарство и рисковать потенциальной токсичностью.

Исследования in vitro важны тем, что позволяют более быстро разрабатывать новые методы лечения, многие лекарства можно изучать одновременно (и их можно изучать на большом количестве образцов клеток), и только те, которые кажутся эффективными, переходят к исследованиям на людях. .

Отсутствие биокинетики (того, как организм переносит и метаболизирует лекарства и токсины) является одним из существенных недостатков исследований in vitro. Это, а также ряд других факторов могут затруднить экстраполяцию результатов тестов in vitro на то, что можно было бы ожидать при использовании препарата in vivo.

В чем разница между In vivo и In vitro?

In vivo и In vitro — два термина, которые в биологии используются для обозначения различных условий исследования. Они отражают два основных подхода в научных исследованиях и имеют существенные различия.

In vivo — это термин, который описывает исследования и эксперименты, проводимые на живых организмах, в их натуральной среде и в организме в целом. В таких исследованиях используются животные модели или даже человеческие пациенты. Такие исследования позволяют получить реалистичные результаты и оценить влияние различных факторов на организм в целом.

In vitro — это термин, который описывает исследования, проводимые в искусственных условиях, вне живого организма. В таких исследованиях используются различные культуры клеток или изолированные ткани. Такие исследования позволяют изучать детали работы отдельных клеток или органов, а также проводить более контролируемые эксперименты, например, с различными препаратами или генетическими манипуляциями.

Основные отличия между In vivo и In vitro можно сказать следующие:

• Условия исследования: In vivo проводятся на живых организмах, в то время как In vitro проводятся в искусственных условиях.
• Уровень детализации: In vivo позволяют изучать организм в целом, в то время как In vitro позволяют изучать детали работы отдельных клеток или органов.
• Контроль эксперимента: В In vivo эксперименты сложнее контролировать из-за множества внешних факторов, в то время как в In vitro экспериментах можно лучше контролировать условия исследования.
• Этические вопросы: Применение In vivo может вызывать этические вопросы, в то время как In vitro эксперименты в большинстве случаев более этичны.

Оба подхода имеют свои преимущества и ограничения, и часто используются в комбинации для получения более полной картины и уточнения результатов исследования.

in vitro в получении гаплоидов

Исходным материалом для селекций служат, и гаплоиды, полученные с помощью метода культуры тканей in vitro. Клетки вегетирующих растений содержат двойной набор хромосом (по одному от каждого родителя). В результате некоторые рецессивные признаки, передаваемые хромосомой, оказываются замаскированными и сразу не проявляются. Их присутствие обнаруживается после расщепления через несколько поколений. Клетки гаплоидных растений содержат одинаковый набор хромосом, так как гаплоиды получают либо из мужских гамет (репродуктивных, клеток), либо из женских. Наиболее современный метод получения гаплоидов — из культуры пыльников и пыльцы. Поскольку у гаплоидов один набор хромосом, их рецессивные или доминантные генетические характеристики сразу видны. Гаплоидные растения обычно бесплодны, но при обработке их колхицином, который вызываете удвоение числа хромосом, получают растения с двумя наборами идентичных хромосом. Данный метод ускоряет создание чистых линий и стабильных нерасщепляющихся гибридных форм.

Как исходный материал для селекции интересны полиплоидные растения. Для получения полиплоидов используют культуру каллюса, которая после многократных пересадок склонна к образованию полиплоидных клеток.

Клональное микроразмножение in vitro играет большую роль для размножения исходного селекционного материала. Это направление связывают с получением и размножением отдельных уникальных генотипов ценных исходных линий, размножением и сохранением единичных ценных элитных форм, гибнущих по техническим или другим причинам.

Большое значение при использовании метода микроклонирования придают созданию здорового (безвирусного) материала. Насчитывают более 52 видов цветочных растений из 26 семейств, у которых применяют микроклональное размножение in vitro.

in vitro представляет большой интерес как метод сохранения исходного материала (ценной зародышевой плазмы) до нужного срока. В зависимости от вида растений материал при температуре -2 °С хранят в течение нескольких лет. Когда возникает необходимость использования данного вида или сорта в селекционной работе, проводят его микроклональное размножение. Немалое значение имеет возможность ускорения селекционного процесса проращиванием трудно и длительно всходящих семян. Так, ирисы садовые прорастают только на второй-третий год после посева, а на искусственной питательной среде из вычлененных зародышей растения, через 4 мес пригодны для высадки в гряды открытого грунта. Аналогичные результаты получают и на лилиях.

Таким образом, выращивание труднопрорастающих гибридных семян в культуре in vitro значительно ускоряет селекционный процесс и дает возможность шире использовать для гибридизации разные далекие виды.

Видео наглядно объясняющее процесс культуры размножения  in vitro:

Предыдущая запись: Букет невесты
Следующая запись: Капризная красавица орхидея

Технические испытания медицинских изделий для диагностики in vitro

Технические испытания медицинских изделий для диагностики in vitro проводятся в целях проверки их качества и безопасности при использовании в соответствии с назначением, предусмотренным документацией производителя. Заявитель самостоятельно выбирает организацию для проведения техиспытаний из числа аккредитованных. Лабораторию для проведения технических испытаний МИ для диагностики in vitro можно выбрать из Реестра аккредитованных для технических испытаний лабораторий см. здесь .

Стоит отметить, что существует дополнительное требование в отношении испытаний МИ для диагностики in vitro особо опасных инфекций. Эти испытания может осуществлять только испытательная организация, имеющая право на работу с микроорганизмами I — II групп патогенности, что обязательно должно быть указано в области аккредитации лаборатории.

После выбора испытательной лаборатории, нужно подготовить все документы, необходимые для технических испытаний. В частности, для испытаний представляются заявление, образцы МИ, сведения о нормативной документации на это МИ, техническая и эксплуатационная документация производителя, фотографии (размером не менее 18 x 24 см). При наличии можно представить и другие документы, например, копии протоколов предварительных испытаний, результатов техиспытаний, проведенных за пределами РФ, необходимые для проведения испытаний для диагностики in vitro таблицы и схемы, компьютерные программы, если они или ссылки на них содержатся в эксплуатационной документации производителя и т.д.

В основу технических испытаний заложены:

• анализ данных научно-технической литературы, относящейся к безопасности, эффективности, функциональности, а также к предусмотренному нормативной документацией, технической и эксплуатационной документацией производителя применению этого медизделия,
• анализ результатов проведенных испытаний.

Срок проведения техиспытаний МИ для дигностики in vitro не отличается от общего, то есть составляет 30 рабочих дней + 20 рабочих дней (если принято решение его продлить), равно как и весь остальной порядок (подробнее см. «Технические испытания медицинских изделий»).

По результатам технических испытаний формируется Акт оценки результатов технических испытаний МИ для диагностики in vitro согласно приложению № 2 к Приказу Минздрава России от 09.01.2014 № 2н, который в обязательном порядке должен содержать следующие Приложения:

• фотографические изображения общего вида медицинского изделия;
• утвержденную программу технических испытаний медицинского изделия (с перечнем проверок, оценок, которые следует проводить при испытаниях);
• протоколы испытаний функциональных характеристик медицинского изделия.